이 글을 작성하는데 많은 도움을 주신 문피아의 토끼왕님, 우울우울님, 오늘의 유머의 까베리앙님 감사합니다.
<b>공부도중. 햇깔리고 햇깔린 나머지 인터넷에 이런 글을 올렸었습니다.</b>
<img src="http://thimg.dreamwiz.com/upfile/201006/1275715461534_1.JPG">
원래는 PCR 결과라고 적어놓은 것 중에 위에것만 생각하고 이렇게 물어보려고 했습니다.
에.. PCR을 했을 때 4번 유전자?가 3'과 5' 방향이 바뀌게 되잖아요.(상보적인 DNA를 보면 3번 유전자도 방향이 바뀌게 되지요.) 그러면 읽는 방향이 아에 바뀌어버리니깐 만들어지는 단백질 등등도 다를 거라고 생각되는데 어떻게 이 방법이 서로다른 DNA를 합치는 방법이 될 수 있나요.
그런데 말이죠...
질문을 하려고 그리다보니깐 primer 3을 붙여서 만든 DNA와 primer 4를 붙여서 만든 DNA가 가운데 서로 상보적이게 만든 애들을 빼고 같게 나와요... 왜요?! 어째서?!!!
그리고 왜 PCR 결과가 완전한 gene 1과 gene 2의 결합이 아닌거지요?
제가 틀린건가요, 아님 원래 pcr 결과가 이렇게 나오는건가요...
<b>그러나 이건 전제 자체가 잘못된 것이었지요.</b> DNA는 특별한 효소가 없는한(맞,,을걸요?) 5'에서 3' 방향으로 복제가 진행되지만 <b>두 번째 단계에서는 5'에서 3'으로 복제가 진행되다가 3'->5'으로 복제가 진행되거든요.</b>
토끼왕님이 이렇게 답해주셨습니다.
빈 === -->>
3' ---------------------------------빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀 5'
5' 빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀--------------------------------- 3'
빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀빈공간이안먹 <<-- ====
(빈공간이 안먹혀는 본인이 적은겁니다)
==== : primer
---- : template
이렇게 적어놓으셨는데 이 그림이 제대로 될려면 아래처럼 되어야 합니다.
위에 그림이랑 아래 그림이랑 사실상 같은 내용이지만 사람이 보고 이해하기에는 확 다를수가 있죠..
3' ---------------------------빈공간이안먹혀빈공<<-- === 5'
5' === -->>빈공간이안먹혀------------------------------- 3'
그래서 저는 다시 물어봤습니다.
<img src="http://thimg.dreamwiz.com/upfile/201006/1275730040534_1.jpg">
요기(nick)는 어떻게 이어붙이나요?
그러자 쌈박하게 답해주셨죠.
'리가아제를 이용하면 됩니다.'
으음... 리가아제라.. 저도 DNA를 이어붙이는데 리가아제를 이용한다는건 알아요.
여기서 이상한걸 눈치챘지요.
<b>'어엉? 리가아제같은거 사용 안하고도 잘만 되던데.. 그럼 뭘 잘못한것인가?!!'</b>
그래서 아에 primer 1,2를 1,4 strand에 붙는게 아니라 2,3 strand에 붙도록 짜봤어요.
<img src="http://thimg.dreamwiz.com/upfile/201006/1275726348534.JPG">
오옷! 뭔가 된거같아!
<img src="http://thimg.dreamwiz.com/upfile/200912/1260442567137_1.gif">
라는 생각을 했지만 또 잘못되었다는 소리를 들었습니다. 으윽...
<b>이렇게 되면 DNA 복제방향이 3'->5'이 되거든요...</b>
그래서 다시 그려봤어요.
<img src="http://thimg.dreamwiz.com/upfile/201006/1275730040534_2.JPG">
이제 primer 3,4를 붙여서 마구마구 복제해줍니다♡
<b>완to the 성!</b>
아자! 아뵤! 아싸라비아콜롬비아 삐약삐약! 올레~!!
묵은 체중이 쑤욱 내려가는 느낌.
PCR은 이 밖에도 실험할때 고려해야하는게 무지 많다고하지만(어제 본 PCR 책 두께가..ㅎㄷㄷㄷ) 뭐. 일단 이론적으로라도 제대로 알게 되어서 기쁩니다. ;ㅁ;
다..다섯시간이나 걸렸지만.
털썩. OTL
내 시험공부...
